En un anterior blog “COMO HAGO UN ANALISIS DE GRUPO SANGUINEO
A MI PACIENTE” se nos quedo corto al solo incluir las pruebas de grupos
sanguíneo que podíais realizar en clínica. En este vamos a completarlo con las
diferentes pruebas que podéis realizar en vuestro laboratorio además enseñaros que pruebas comerciales hay
en España. Y además que veíais que no se necesita una gran infraestructura Laboratorial
para poder realizar correctamente una transfusión.
Las pruebas
que vais a realizar en el laboratorio de la clínica son las siguientes:
·
Medición
del hematocrito
·
Medición
de las proteínas
·
Aglutinación
en porta o tubo
·
Prueba
de reacción cruzada
·
Prueba
de Coombs indirecto
·
Determinación
de grupo sanguíneo.,
MEDICIÓN DEL
HEMATOCRITO
La valoración del hematocrito la podéis
realizar de diferentes maneras bien sea por los tubos de microhematocrito o por
cualquiera de los contadores hematológicos que dispongáis en la en clínica.
Solo con el valor del hematocrito nos vale para valorar si es necesaria un transfusión
recordar que es obligatorio transfundir por debajo de 20% de hematocrito en
perros y caballos y de 15% en gatos y conejos, aunque no presenten síntomas de
anoxia, el resto de los datos de un hemograma no los necesitamos en hemoterapia,
pero nos ayudaran a realizar un diagnostico de nuestro paciente que lo
tendremos que complementar con un frotis sanguíneo.
MEDICIÓN DE LAS
PROTEÍNAS
La
valoración de las proteínas la realizaremos de forma sencilla con un refractómetro,
igualmente este dato lo tendréis en los perfiles bioquímicos de vuestros
aparatos de análisis. Recordar que si medición de la muestra no la realizáis
con suero sino que lo hacéis con plasma tendréis que hacer un a curva de
calibración para realizar la corrección de la misma por culpa del
anticoagulante y esta será diferente según el tipo de anticoagulante que utilicéis.
AGLUTINACIÓN EN PORTA O
EN TUBO
Se toma una gota de sangre de donante
y receptor se mezclan y las depositamos en un portaobjetos o en un tubo de
ensayo. En el caos del portaobjetos lo moveremos suavemente si pasados unos
minutos se mantiene homogénea la muestra es que no hay aglutinación y hay
compatibilidad sanguínea. Con el tubo es necesaria una mayor experiencia para
visualizarla, se depositan una gota de donante y receptor en un tubo de ensayo
se agitan y pasados unos minutos daremos un golpe seco al tubo visualizando
como la sangre resbala por las paredes del tubo, si no se visualizan grumos
(aglutinados) es que la sangre es compatible. Este método es el menos
recomendable para determinar la compatibilidad sanguínea, pero es fiable en
gatos, realizando una variación del mismo y es utilizar una gota de plasma con
una gota de los eritrocitos y mezclarlo. Recordar que la prueba siempre se debe
de realizar por encima de 15°C ya que la prueba busca la reacción con Ig G, si necesitáremos
realizar la misma buscando Ig M esta la realizaríamos por debajo de esta temperatura.
PRUEBA DE REACCIÓN
CRUZADA
Se
hacen reaccionar eritrocitos con plasma del donante y del receptor. SE realizan
dos reacciones denominadas complejo mayor que será la mezcla de eritrocitos del
donante con el plasma del receptor y el complejo menor, eritrocitos del
receptor con el plasma del donante y como control negativo para poder validar
la prueba utilizaremos la sangre del receptor. Tomaremos una muestra de sangre a donante y
receptor entre 0,5 a 1 mL, se deposita en un tubo con anticoagulante. Centrifugaremos
ambas a 3000 g 1 minuto. Retiraremos el plasma del tubo y lo guardaremos
etiquetado en tubos limpios. Los eritrocitos se resuspenden con solución salina
fisiológica (ClNa 0,9%) volviendo a centrifugarse, por tres veces se realiza proceso.
eliminando y sustituyendo la solución salina fisiológica por una nueva Después
de los lavados de la solución de eritrocitos, tomaremos una muestra de la misma para mezclarla con el
plasma de la firma siguiente:
Reacción cruzada mayor: 1 gota de la
solución eritrocitos del donante + 2 gotas de plasma del receptor.
Reacción cruzada menor: 1 gota de la
solución eritrocitos del receptor + 2 gotas de plasma del donante.
Control Negativo: 1 gota de la
solución eritrocitos del receptor + 2 gotas de plasma del receptor.
Incubaremos
los tubos entre 25 - 37ºC durante 20 minutos. Se centrifugaran los tubos a 3000
g durante 1 minuto. Sacudiremos el tubo con un golpe seco y observaremos si
existe o no aglutinación.
Los resultados obtenidos nos indicaran
que producto podemos transfundir:
Las
tres reacciones negativas: sangre entera, concentrado de hematíes, plasma
Positiva
la reacción mayos: solo plasma
Positiva
la menor: solo concentrado de hematíes
Positivo
el control: el receptor esta aglutinando. La prueba no es valida debe repetirse
con mayor numero de lavado de la sangre del receptor.
Os dejo una explicación grafica de
cómo realizar la prueba.(descárgatela de
nuestra web www.ctveterinaria.com en
la sección de descargas).
En España podéis adquirir un kit para
realizar la prueba de la marca ALVEDIA.
CANINO
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5 PRUEBAS
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LAB TEST XM
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TEST INDIRECTO DE
COOMBS
Es test de Coombs,
nos permite visualizar una aglutinación de la sangre principalmente en clínica
se usa la prueba directa pero en hemoterapia utilizamos la indirecta. La
diferencia está en que utilizamos sangre de dos perros plasma de receptor con
eritrocitos del donante, sería el complejo mayor de la prueba de reacción
cruzada a la que se añade el suero de Coombs,. se desencadena una mayor aglutinación
en la muestra al unírselas inmunoglobulinas del suero a la fracción FC de las
Ig G
Si vais a
realizar la prueba en vuestro laboratorio acordaros que el suero de Coombs es
especifico de especie así que tendréis que disponer suero de perro y de gato .
El
laboratorio ALVEDIA dispone en el mercado de un kit para realizar la prueba.
CANINO
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MONODOSIS
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10
PRUEBAS
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QUICK TEST
DAT
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LAB TEST DAT
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